Projetos de pesquisa finalizados

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Projeto de pesquisa


  • Perfil transcricional de metalotioneínas, avaliação de parâmetros da imunidade inata e alterações histológicas do siri azul (Callinectes danae Smith, 1869) Crustacea- Portunidae, após exposição ao chumbo (Pb).

     
  • Coordenador do projeto: José Roberto Machado Cunha da Silva  
  • Autor ou executor principal do projeto: Willian Reina Joviano  
  • Número do projeto: 987  
  • Categoria: Mestrado 
  • Data de início das atividades no CEBIMar: 02/04/2018  
  • Data de término das atividades no CEBIMar: 19/03/2019  
  • Resumo: Metais como chumbo (Pb) podem constituir fonte de poluição ambiental difusa e de difícil controle e remediação. Espécies cosmopolitas como os siris azuis do gênero Callinectes sp. podem indicar a disponibilidade de contaminantes por meio de biomarcadores (alterações em diversos níveis do organismo), desde moleculares, imunológicos até histológicos. Diversos trabalhos verificaram a presença de metais em Callinectes sp. todavia, aspectos imunológicos e histológicos referentes à exposição destes metais tem recebido pouca atenção, principalmente para espécie-alvo deste estudo, o Callinectes danae. Considerando o exposto, o presente projeto tem por objetivo avaliar parâmetros imunológicos inatos, bem como alterações histológicas em siris azuis (Callinectes danae) expostos a 2 μg/mL de Pb pelos períodos de 24h, 48h e 96h. Para tanto, o perfil da hemolinfa será avaliado com parâmetros de contagem diferencial de hemócitos, viabilidade celular, ensaios de fagocitose in vitro, capacidade germicida, análises da produção de ânion superóxido e perfil transcricional de metalotioneínas. Os parâmetros de alterações histológicas serão realizados por meio da mensuração de glicogênio do hepatopâncreas e pela contagem de células de muco das brânquias. Alterações morfológicas em ambos tecidos também serão consideradas. Além disso, será feita análise de bioacumulação de chumbo nos diferentes tecidos após exposição.
     
  • Metodologia: Coletas de siris azuis (Callinectes danae) serão realizadas de indivíduos na intermuda com aproximadamente o mesmo tamanho, sendo também mensurados quanto ao peso total, largura (desconsiderando os espinhos) e comprimento da carapaça. O sexo será identificado de acordo com Willians (1974), e o estágio de maturação pela forma e grau de aderência do abdômen aos esternitos torácicos. Logo após a coleta, 5 indivíduos serão sacrificados com objetivo de verificar previamente os níveis basais de Pb dos organismos no ambiente (controle ambiental). Os demais serão transportados vivos para o laboratório, onde permanecerão alimentados com dieta não-contaminada por 5 dias em aquários individualizados de 5 litros, preenchidos com água artificialmente salinizada (salinidade de 20-25‰) de forma a eliminar o máximo de contaminantes que possam ter absorvido no ambiente (período de depuração). Após depuração, outros 5 indivíduos serão sacrificados para avaliação dos níveis de contaminação que os organismos atingiram após depuração (grupo depuração). Os demais siris (n=5 por grupo) serão individualmente expostos a 2 μg/mL em água artificialmente salinizada (20-25‰). As concentrações serão obtidas através de uma solução estoque (solução ultrapura de chumbo inorgânico – PerkinElmer 10000 μg/mL), em grupos de diferentes tempos (24h, 48h e 96h com seus respectivos controles). Hemolinfa, brânquias, hepatopâncreas e músculos serão coletados para analises imunológicas, histológicas e moleculares referentes a exposição. 
     
  • Etapas e cronograma: Coletas e exposições no Cebimar (Jan-2018 a Set-2018); Análises dos parâmetros imunes (Mai-2018 a Set-2018); Análises dos parâmetros histológicos (Set-2018 a Dez-2018); Análises do perfil transcricional de metalotioneínas (Dez-2018 a Març-2019); Análises estatísticas e elaboração da dissertação (Març-2019 a Agost-2019).
     
     
     
     
  • Palavras-chave: Metais, Callinectes, Chumbo, Poluição ambiental. 
  • Condições ambientais: Nenhuma condição especial ;   
  • Área necessária no laboratório: Laboratório com espaço para acomodação de aquários e realização de ensaios de biologia celular. 
  • Equipamentos de laboratório: Aquários, água do mar, conchas marinhas, vidrarias volumétricas, ácido nítrico, etanol, balança, aquecedor com agitador magnético. No demais, equipamentos serão levados. 
  • Será necessário: Montagem de alguma estrutura (estantes, aquários etc) ;  Colocação ou fundeio de alguma estrutura no mar ;  Auxílio técnico para manutenção de estruturas ou material biológico na ausência dos participantes do projeto ;  Auxílio técnico para coleta de organismos ou observações de campo ;  Coleta antecipada de organismos ;  Utilização de embarcação do CEBIMar ;   

  • Outros serviços de laboratório: Não será necessário. 
  • Organismos a serem coletados: Siri azul (Callinectes danae). 
  • Locais para coleta: Nos manguezais próximos ao CebiMar 
  • Tipos de resíduos químicos e/ou infectantes a serem gerados durante o projeto: solução ultrapura de chumbo inorgânico (Pb) – PerkinElmer 10000 μg/mL 
  • Quantidade de cada tipo de resíduo: Aproximadamente 160 L de água contendo 2 μg/mL de chumbo.
  • Periodicidade aproximada da geração dos resíduo: Aproximadamente 160 L de água contendo 2 μg/mL de chumbo em duas semanas de experimento.
  • Instituição(ções) de origem do projeto:

    • USP. Instituto de Ciências Biomédicas  Departamento de Biologia Celular e Desenvolvimento 
     
  • Participante(s) do projeto:

    • Nome: Amanda Ribeiro Rosa  
    • Função no projeto: Mestrando 
    • Início das atividades no projeto: 03/04/2018  
    • Fim das atividades no projeto: 29/08/2019  
    • Nome: Andrews Krupinski Emerenciano  
    • Função no projeto: Outra função 
    • Início das atividades no projeto: 02/04/2018  
    • Fim das atividades no projeto: 28/09/2019  
    • Nome: Letícia Palmeira Pinto  
    • Função no projeto: Outra função 
    • Início das atividades no projeto: 02/04/2018  
    • Fim das atividades no projeto: 28/09/2019  
     
  • Recurso(s) destinado(s) ao projeto:

    • Situação: Não informado 
    • Agência de fomento: CNPq 
    • Tipo de recurso: Bolsa 
    • Especificar o tipo de recurso: Bolsa do departamento destinado ao aluno. 
    • Recursos em nome de: Willian Reina Joviano 
     

    Produção(ões) bibliográfica(s) gerada(s) pelo projeto:

    Total de produções bibliográficas: 0


  • Data de cadastro do projeto: 19/03/2018  
  • Data da última modificação: 20/06/2018  

          

            Notícias

    

                  

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