Projetos de pesquisa em andamento

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Projeto de pesquisa


  • Seleção sexual pós-copulatória em uma espécie de lula (Mollusca: Cephalopoda) com dimorfismo intrassexual masculino e dois sítios de fertilização

     
  • Coordenador do projeto: José Eduardo Amoroso Rodriguez Marian  
  • Autor ou executor principal do projeto: Lígia Haselmann Apostólico  
  • Número do projeto: 972  
  • Categoria: Doutorado 
  • Data de início das atividades no CEBIMar: 30/11/2017  
  • Data de término das atividades no CEBIMar: 30/07/2021  
  • Resumo: Em espécies em que a fêmea copula com vários machos, seleção sexual e disputa pela paternidade podem ocorrer mesmo após a cópula, via competição espermática e escolha críptica da fêmea. Lulas Loliginidae exibem comportamentos sexuais complexos e machos adotam táticas alternativas de reprodução. Machos consorts depositam espermatóforos na cavidade do manto da fêmea, enquanto machos sneakers depositam espermatóforos no receptáculo seminal. Utilizando o loliginídeo Doryteuthis plei como modelo, este projeto objetiva investigar o sucesso reprodutivo de consorts e sneakers e os possíveis mecanismos envolvidos na competição pós-copulatória entre machos dimórficos e entre machos pertencentes ao mesmo morfo. Além disso, este projeto almeja aprofundar o conhecimento sobre o dimorfismo intrassexual masculino na espécie de estudo. Os resultados deste projeto servirão de base para a compreensão dos mecanismos de seleção sexual pós-copulatória em um grupo que apresenta dois sítios de fertilização.
     
  • Metodologia: Machos e fêmeas sexualmente maduros de Doryteuthis plei serão coletados e mantidos em tanques no CEBIMar para experimentos de cópula e desova. Ao todo, serão realizados três experimentos (N=10 por experimento), os quais visam a comparar o sucesso reprodutivo entre machos sneaker e consort (por meio de análises de paternidade dos embriões) em uma mesma desova. No primeiro experimento, as fêmeas serão mantidas com um macho consort e um sneaker até ocorrência de cópula e desova. No segundo experimento, as fêmeas serão mantidas com um macho sneaker até ocorrência de cópula e desova. Por fim, no terceiro experimento, as fêmeas serão mantidas com um macho sneaker até ocorrência de cópula. O macho será então substituído por novo macho sneaker e ambos serão mantidos até ocorrência de cópula e desova. Após o término de cada experimento, as desovas serão mantidas em água do mar circulante por cerca de sete a nove dias, até que os embriões atinjam estágio próximo à eclosão, de forma que seja possível extração adequada de DNA para genotipagem de microssatélites. Todos os indivíduos experimentais, incluindo embriões, serão fixados em álcool a 100% para genotipagem e análises de paternidade. Além disso, receptáculos seminais das fêmeas experimentais, assim como hectocótilos e espermatozoides de machos, serão fixados em fixador de Karnovsky para análises de ultraestrutura e histologia.
     
  • Etapas e cronograma: As coletas serão realizadas nos meses de verão, geralmente entre novembro e fevereiro, entre os anos de 2017-19, ao largo do litoral norte da Ilha de São Sebastião (Município de Ilhabela, SP). Os animais serão capturados com zangarelhos e transportados ao CEBIMar/USP, onde serão alojados em tanques com água do mar circulante. Os experimentos de cópula e desova em tanque descritos no item acima serão realizados durante nossa estadia nas dependências do CEBIMar. As desovas obtidas nos experimentos serão mantidas em água do mar circulante por cerca de sete a nove dias, conforme descrito no item acima. Todos os indivíduos experimentais, assim como as desovas e embriões, serão fixados em álcool a 100% para genotipagem e análises de paternidade, as quais serão realizadas no Departamento de Zoologia/IB. As análises de paternidade serão realizadas nos meses subsequentes às coletas, i.e., entre março e outubro dos anos de 2017-19. Os receptáculos seminais das fêmeas experimentais, assim como hectocótilos e espermatozoides de machos, serão fixados em fixador de Karnovsky para análises de ultraestrutura e histologia, as quais também serão realizadas no Departamento de Zoologia nos meses subsequentes às coletas, i.e., entre março e outubro dos anos de 2017-19. O período compreendido entre Jan/20 até o término do projeto (Jul/21) será dedicado às análises estatísticas e descrição dos resultados, assim como à redação da tese e manuscritos.
     
  • Palavras-chave: competição espermática; escolha críptica da fêmea; táticas alternativas de reprodução; sucesso reprodutivo; microssatélites 
  • Condições ambientais: Nenhuma condição especial ;   
  • Área necessária no laboratório: Bancada em laboratório para dissecção. Cerca de 3 a 5 tanques com água do mar circulante para manutenção temporária e experimentos. Profa. Renata Guimarães autorizou o uso dos tanques circulares. 
  • Equipamentos de laboratório: Espaço em refrigerador para armazenar reagentes (fixadores e amostras fixadas). 01 estereomicroscópio para dissecção e 01 microscópio. 
  • Será necessário: Utilização de embarcação do CEBIMar ;   

  • Outros serviços de laboratório: Não será utilizado nenhum serviço de laboratório além dos citados acima. 
  • Organismos a serem coletados: Doryteuthis plei - lula. As coletas serão realizadas ao longo dos meses de novembro a fevereiro de 2017 a 2019. Utilizaremos embarcação pesqueira arrendada e/ou embarcação do CEBIMar (Tamoya). 
  • Locais para coleta: As coletas serão realizadas ao largo do litoral norte da Ilha de São Sebastião (23º44’00” S e 45º17’50” W), município de Ilhabela, São Paulo. 
  • Tipos de resíduos químicos e/ou infectantes a serem gerados durante o projeto: O único reagente que será descartado será o fixador de Karnovsky, utilizado para fixação de amostras de receptáculos seminais, hectocótilos e espermatozoides. Após a transferência das amostras para o tampão Cacodilato de sódio, no qual as amostras serão preservadas de forma permanente, o fixador de Karnovsky será recolhido em descarte específico e trazido para o Departamento de Zoologia/IB, onde ocorrerá o descarte final de forma adequada. Já as amostras de indivíduos experimentais e embriões fixados em álcool a 100% para genotipagem de microssatélites não gerarão resíduos. 
  • Quantidade de cada tipo de resíduo: Estima-se o descarte de aproximadamente 100 ml de fixador de Karnovsky ao longo de todo o período de coleta compreendido entre os anos de 2017 e 2019.
  • Periodicidade aproximada da geração dos resíduo: A geração de resíduos ocorrerá durante o período de coleta e experimentação em tanque no CEBIMar, i.e., ao longo dos meses de novembro a fevereiro de 2017 a 2019.
  • Instituição(ções) de origem do projeto:

    • USP. Instituto de Biociências  Departamento de Zoologia 
     
  • Participante(s) do projeto:

    Nenhum participante incluído.
     
  • Recurso(s) destinado(s) ao projeto:

    Nenhum recurso incluído.  

    Produção(ões) bibliográfica(s) gerada(s) pelo projeto:

    Total de produções bibliográficas: 0


  • Data de cadastro do projeto: 21/08/2017  
  • Data da última modificação: 01/09/2017  
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