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Projeto de pesquisa

  • Ascidian maternal response in caloric deprivation: fertilization block, extraembryonic membranes interaction, and infertility modulation in solitary ascidians.

  • Coordenador do projeto: Federico David Brown Almeida  
  • Autor ou executor principal do projeto: OSCAR PEREZ  
  • Número do projeto: 1007  
  • Categoria: Doutorado 
  • Data de início das atividades no CEBIMar: 01/01/2019  
  • Data de término das atividades no CEBIMar: 31/12/2020  
  • Resumo: The increment of intracellular Calcium ([Ca2+]) in the egg cytoplasm induce egg activation and blocks polyspermy (Jaffe, L.A., 2018). This increment is universal for all animals and produce conserved processes as completion of meiosis II, translation of maternal mRNAs and release of cortical granules (Burry et al., 2016). Cortical granules are excretory calcium dependent organelles, which modify the extracellular matrix of the oocyte through exocytosis. This process is called Cortical Reaction.  The mechanical result of cortical reaction is to harden the outer accessory layers of the egg (Harper, J.C., 2011). Contents of cortical granules causes this hardening due to proteolytic action of many enzymes, notably by glycosidases (Wassarman, P.M., 2001). More specifically, the calcium sensor Synaptotagmin regulates cortical exocytosis helped by the activation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II (CAMKII) and myosin light chain kinase (MLCK) (Burry et al., 2016). Nonetheless is reported that these processes are universal for all animals, there is a notable exception within the ascidian egg. Ascidians prevent polyspermy by the increment of intracellular calcium and release of glycosidases, but do not have cortical granules (Gallo, A., 2016). It is not clear how the glucosidase is released but it is proposed to be mediated by subcortical acellular envelopes of the egg (Lambert, C., 1989). Strong evidence has demonstrated that different isoforms of ascidian glucosidase are present not only in the egg but also in follicular accessory cells of the egg (Koyanagi & Honegger, 2003).  None of these investigations has a description, nor molecular analysis of the process of the release of glucosidase in the ascidian egg or follicular accessory cells. Preliminary results of the EVODEVO lab at USP suggest that caloric deprivation would lead to an “induced infertility”. These results suggest that a possible interaction between the egg and the follic 
  • Metodologia: I will perfom a simple experiment of caloric deprivation and evaluate the resulting eggs morphologically and molecularly. Morphological features of the egg as test cells, viteline coat, and follicular cells will be evaluated in low caloric treatment in comparison with positive controls. Viability of the gametes will be tested with in vitro fertilization and embryological comparison with normal developmental tables for P. nigra
  • Etapas e cronograma: Cronograma experimentos de restrição calórica:
    Ano 2019: Visita Janeiro e fevereiro, Visita jagosto
    Ano 2020: Visita Janeiro, Visita agosto
  • Palavras-chave: Calcium ([Ca2+]); egg activation; polyspermy; cortical granules; glycosidases. 
  • Condições ambientais: Nenhuma condição especial ;   
  • Área necessária no laboratório: Em cada viagem precissarei 6m2 de bancada de laboratório para 8 com tanques 15-20L para colocar ascidias com agua marinha circulante (no possível, uma Sala no Laboratório Erasmo Garcia Mendes). 
  • Equipamentos de laboratório: Microscópio e Lupa 
  • Será necessário: Utilização de embarcação do CEBIMar ;   

  • Outros serviços de laboratório: Não 
  • Organismos a serem coletados: Ascidia Phallusia nigra, colonias Symplegma rubra, colonias Botryllus tabori o B. schlosseri. 
  • Locais para coleta: Yacht Club IlhaBela, SP e CEBIMAR 
  • Tipos de resíduos químicos e/ou infectantes a serem gerados durante o projeto: Nenhum (resíduo biológico) 
  • Quantidade de cada tipo de resíduo: Nenhum (1 sacolas por viagem)
  • Periodicidade aproximada da geração dos resíduo: Nenhuma
  • Instituição(ções) de origem do projeto:

    • USP. Instituto de Biociências  Cidade Universitaria. Butanta Sao Paulo. Laboratorio 166 
  • Participante(s) do projeto:

    Nenhum participante incluído.
  • Recurso(s) destinado(s) ao projeto:

    • Situação: Concedido 
    • Agência de fomento: Outra agência. Pontificia Universidad Católica del Ecuador - PUCE 
    • Tipo de recurso: Bolsa 
    • Especificar o tipo de recurso: Desarrollo Docente 
    • Recursos em nome de: OSCAR PEREZ 
    • Recursos destinados ao CEBIMar após o término do projeto: Informes de avances de proyecto

    Produção(ões) bibliográfica(s) gerada(s) pelo projeto:

    Total de produções bibliográficas: 0

  • Data de cadastro do projeto: 08/11/2018  
  • Data da última modificação: 16/12/2018  





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